原儿茶酸论文


超声波提取五味子中原儿茶酸的工艺研究

    五味子为落叶木质藤本植物，其药材主要含有挥发性成分、木脂素类及酸性成分。有文献报道，五味子中含有的原儿茶酸口]，能降低心肌耗氧量，拮抗肾上腺素所致的耗氧量增加，提高心肌耐氧能力，减慢心律，改善缺血中心区的乳酸和 K 的产生，显著缩小心肌梗塞范围 。

1 材料
1.1 主要仪器LC一2010AHT高效液相色谱仪，SPD一10A 紫外检测器(Et本岛津公司)，KQ一50型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试剂五味子(产地四川广元青川)；原儿茶酸对照品 (中国药品生物制品检定所，批号：110809—200503)；甲醇为色谱纯；水为三次蒸馏水；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果
2.1 五味子中原儿茶酸含量的测定 2.1.1 色谱条件色谱柱：日本岛津公司Shim—pack VP— ODS(150mm×4.6 mm，5.0(m)，流动相：甲醇一水一冰醋酸 (6：92.8：1.2)，流速：1.0mL／min，紫外检测波长：295nm，柱温：30~C。理论塔板数按原儿茶酸峰计算大约为5000，采用外标法峰面积定量，色谱图如图1。

2.1.2 供试品溶液的制备将五味子在60℃ 的烘箱中干燥 12小时后研细过筛，精密称取粉碎的五味子粉末0.5g，按L1 (4 )[41正交试验表所列进行实验，加入乙醇，两滴冰醋酸，称定重量，超声波提取后，待溶液冷却到室温后，再称定重量，用相应浓度的乙醇补足减失的重量，摇匀。用0.45(m的滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。

2.1.3 对照品溶液的制备精密称取16.Omg原儿茶酸对照品，用甲醇定容于50mL容量瓶中，摇匀，制得320~g／mL的 原儿茶酸贮备液，取5.00mL于50mL的容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，制得32.0p,g.mL 的原儿茶酸的工作液。

2.1.4标准曲线的绘制 精密吸取原儿茶酸的工作液，置 10mL容量瓶中，用甲醇定容，分别配制成3.20，6.40，19.232.0，51.2，64.0，96.01xg／mL原儿茶酸标准液。分别自动进样5(L，记录色谱图，分别测定峰面积，以原儿茶酸峰面积(s) 对进样浓度(Ixg／mL))作线性回归，得回归方程为s=一1548 +9.181 X 10 (r=0.9999)，说明浓度在3.2～961~g／mL范围内，浓度与峰面积有良好的线性关系。

2.1.5精密度试验自动进样32.0~g／mL原儿茶酸对照品标准液5(L，重复6次，按上述色谱条件进行测定，RSD为0. 72% ，表明仪器精密度良好。

2.1.6加样回收率试验精密称取同批号药材约0.5g，准确加入原儿茶酸对照品标准液(32.otLg／mL)2.0mL，按“2.1.3” 制备5组供试品溶液，自动进样5 ，按样品含量测定方法测定，计算回收率。结果，平均回收率为100.3%，RSD为1.2 % o

2.1.7样品含量测定取待测样品溶液，自动进样5fzL，按照上述色谱条件下进样测定。重复进样3次，取平均值，根据线性回归方程，用外标法计算样品中原儿茶酸的含量。

2.2正交试验设计
2.2.1 超声波辅助正交试验以加入乙醇浓度(A)，固液比 (B)，超声时间(C)作为考察因素，以原儿茶酸在五味子中的含量为指标，选用L (4 )正交法进行试验，试验因素水平见表1。

2.2.2 正交试验的结果及分析按照Ll (4 )正交表安排试验，以原儿茶酸在五味子中的含量为指标，直视法分析结果详见表2，表3。

从表2中数据直观分析，不同因素水平综合评分A >A >A3>AI，B4>B2>B3>Bl，C4>C2>C3>C1，4个因素的极差大小顺序为R >R >R ，，固液比对原儿茶酸含量影响最大，乙醇浓度影响较小，超声提取时间影响最小。

由表3方差分析结果可知，因素B对原儿茶酸提取有重要影响，影响因素达到显著差异水平，因素A、C则无显著性影响。综合以上因素，确定最佳提取工艺为A：B4C ，即使用的乙醇浓度为40% ，固液比1：60，超声波提取时间为50min。

2.3 验证试验按正交试验结果的最佳提取工艺方案重复试验5次，结果原儿茶酸的平均含量为0.623mg／g，RSD为1. 6%，表明该工艺重现性良好。

3 讨论
五味子中原儿茶酸的最佳提取工艺参数：提取的乙醇浓度40% ，固液比l：60，超声波辅助提取时间50min。该提取工艺稳定可靠，精密度高，操作简便，可用于五味子中原儿茶酸 的提取和五味子的质量控制，适合于厂家的常规提取和测定应用。