溶解氧的测定（靛蓝二磺酸钠比色法）
1 范围
本标准对水中化学需氧量测定的方法、仪器、试剂、试验步骤及注意事项进行了明确的规定。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
3 方法概要
在pH为8.5左右时，氨性靛蓝二磺酸钠被锌汞齐还原成浅黄色化合物，当其与水中溶解氧相遇时，又被氧化成蓝色，其色泽深浅和水中含氧量有关。本法适用于测定溶解氧为（2～100）μg/L的除氧水、凝结水、灵敏度为2μg/L；不适用于含氯化物浓度大于1000mg／L(稀释后)的含盐水。
4 仪器
4.1 锌汞齐滴定管：取50mL酸式滴定管一支，在其底部垫一层厚约1cm的玻璃棉，先在滴定管中注满水，然后装入制备好的粒径为（2～3）mm的锌汞齐约30mL，在充填时应不时振动，使其间不存在气泡。
4.2 专用溶氧瓶：具有严密磨口塞的无色玻璃瓶，其容积为（200～300）mL。
4.3 取样桶：桶的高度至少比溶氧瓶高150mm若采用溢流法取样，可不备取样桶（见本法注释①）
5 试剂
5.1 高锰酸钾标准液[c（1/5KmnO4）=0.01mol/L]。
5.2 硫酸溶液（1+3）
5.3 酸性靛蓝二磺酸钠储备液
称取（0.8～0.9）g靛蓝二磺酸钠（C16H8O8N2S2Na，M=466.36）于烧杯中，加1mL除盐水，使其润湿后，加7mL浓硫酸，在水浴上加热30min，并不断搅拌，加少量除盐水，待其全部溶解后移入500mL容量瓶中，用除盐水稀释至刻度，混匀（若有不溶物需要进行过滤）。标定后用除盐水计算稀释，使T=40μg/mL（此处T应按一摩尔分子靛蓝二磺酸钠与一摩尔原子氧作用来计算）
5.4 氨—氯化铵缓冲溶液
称取20g氯化铵溶于200mL水中，加入50mL浓氨水稀释至1l。取20mL缓冲溶液与20mL酸性靛蓝二磺酸钠储备溶液混合，测定其pH。若pH大于8.5可用硫酸溶液（1+3）调节pH至8.5。反之，若pH小于8.5，可用10%氨水调节pH至8.5。根据加酸或氨水的体积，往其余980mL缓冲溶液加入所需的酸或氨水，以保证以后配制的氨性靛蓝二磺酸钠缓冲溶液的pH=8.5。
5.5 氨性靛蓝二磺酸钠缓冲溶液
取T=40酸性靛蓝二磺酸钠储备液50mL于100mL容量瓶中加入50M氨—氯化铵缓冲溶液（按1∶1的比例混合）混匀。此溶液的Ph=8.5。
5.6 还原型靛蓝二磺酸钠溶液
向以装好锌汞齐的还原滴定管中，注入少量氨性靛蓝二磺酸钠缓冲溶液以洗涤锌汞齐，然后以氨性靛蓝二磺酸钠缓冲液注满还原滴定管（勿使锌汞齐间有气泡）。静置数分钟，待溶液由蓝色完全转变成黄色后方可使用。此液还原速度随着温度升高而加快，但不得超过40℃。
5.7 苦味酸溶液
称取0.74g已干燥过的苦味酸，溶于1L除盐水中。此溶液的黄色色度相当于20μg/mL还原型靛蓝二磺酸钠浅黄色化合物的色度。
5.8 锌汞齐的制法
5.8.1 第一法：预先用乙酸溶液（1+4）洗涤粒径为（2～3）mm的锌粒或锌片，使其表面成金属光泽。将酸沥尽，用除盐水冲洗数次，然后浸入饱和的硝酸汞溶液中，并不断搅拌，使锌表面覆盖一层均匀汞齐，取出用除盐水冲洗至中性为止。
5.8.2 第二法：锌粒处理同第一法。将处理好的锌粒置于200nL烧杯中加乙酸溶液（2+98）约100mL浸泡锌粒，用吸管滴加汞，并不断搅拌，使锌粒表面形成汞齐。汞的加入量以锌粒表面形成汞齐为宜。然后用除盐水冲洗至中性。
6 测定方法
6.1 储备液的标定
取10mL酸性靛蓝二磺酸钠注入100mL锥形瓶中，加10mL除盐水和10mL硫酸溶液（1+3）用高锰酸钾标准溶液滴定至溶液恰变成黄色为止。其滴定度T（μg/mL）按下式计算：
T = 1/2a·c×8/V×1000
式中：
a——滴定时所耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL；
a——滴定时所耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL；
c——高锰酸钾标准溶液的物质的量浓度，mol/L；
V——所取酸性靛蓝二磺酸钠储备液的体积，mL；
8——氧（1/4O2）的摩尔质量，g/mol；
1/2—把靛蓝二磺酸钠和高锰酸钾反应时的滴定度换算成和溶解氧反应时的滴定度的系数。
注：1）本方法中C最大，对凝结水来说，为100μg/L，对锅炉水为50μg/L。
6.2 标准色的配制
本法测定范围（2～100）μg/L，故标准色阶中最大标准色所相当的溶解氧含量
（C最大）1）为100μg/L。为使测定时由过量的还原型靛蓝二磺酸钠同氧反应，所以采用还原型靛蓝二磺酸钠的加入量为C最大的1.3倍。据此，在配制标准色阶时，先配制酸性靛蓝二磺酸钠溶液（T=20μg/ml），然后，按下式计算酸性靛蓝二磺酸钠溶液的加入体积V靛（ml）和苦味酸溶液（T=20μg/ml）的加入体积V苦（ml）。
V靛 = c·V1/1000×20
V苦 = V1（1.3 C最大- c）/1000×20
式中：
c——标准色所相当的溶解氧含量，μg/L；
c——标准色所相当的溶解氧含量，μg/L；
V1——配成标准色溶液的体积，mL；
C最大——最大标准色所相当的溶解氧含量，100μg/L；
表12-2-1为按上式计算配制500mL标准色，所需T均为20μg/ml时，酸性靛蓝二磺酸钠和苦味酸溶液的需要量。
把配制好的标准溶液注入专用溶氧瓶中，注满后用蜡密封。此标准色使用期限为一周（多余的标准色弃去）。
表12—2—1 溶解氧标准色的配制
|
瓶号 |
相当溶解氧含量
μg/L |
配制标准色时体积，mL | |
|
V靛 |
V苦 | ||
|
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13 |
0
5
10
15
20
30
40
50
60
70
80
90
100 |
0
0.125
0.250
0.375
0.500
0.750
1.000
1.250
1.500
1.750
2.000
2.250
2.500 |
3.250
3.125
3.000
2.875
2.750
2.500
2.250
2.000
1.750
1.500
1.250
1.000
0.750 |
6.3 测定水样时所需还原型靛蓝二磺酸钠溶液加入量D（mL），可按下式计算：
D=1.3 C最大·V1/1000×20
式中：
C最大——最大标准色所相当的溶解氧含量，μg/L；
V1——水样的体积，mL。
如水样瓶体积V1为280 mL，则 D = 130×280/1000×20≈1.8
6.4 水样的测定
6.4.1 取样桶和溶氧瓶预先洗干净，然后将溶氧瓶放在取样桶内，将取样管（厚壁胶管）插入溶氧瓶底部，使水样充满溶氧瓶，并溢流不少于3min。水样流量约（500～600）ml/min，其温度不超过35℃，最好能比环境温度低（1～3）℃。
6.4.2 将锌还原后滴定管慢慢插入溶氧瓶内，轻轻抽出取样管，立即按上式计算量加入还原型靛蓝二磺酸钠溶液。
6.4.3 轻轻抽出取样管并立即塞紧瓶塞，在水面下混匀，放置2min，以保证反应完全。
6.4.4 从取样桶内取出溶氧瓶，立即在自然光或日光灯下，以白色为背景同标准进行比较。
6.4.5 取样也可以用溢流法进行，其它操作都相同。
注：
①溢流取样是指利用水样的较高流速，使溶氧瓶口上形成隔绝空气的水屏蔽层，当加入还原靛蓝二磺酸钠溶液时，应先把锌还原滴管沿着瓶口边缘排掉已被氧化的靛蓝二磺酸钠，然后在水屏蔽层保护下轻轻插入瓶内，拔出取样管，并立即加入一定量的还原型靛蓝二磺酸钠溶液，采用此法时不需取样桶。
①溢流取样是指利用水样的较高流速，使溶氧瓶口上形成隔绝空气的水屏蔽层，当加入还原靛蓝二磺酸钠溶液时，应先把锌还原滴管沿着瓶口边缘排掉已被氧化的靛蓝二磺酸钠，然后在水屏蔽层保护下轻轻插入瓶内，拔出取样管，并立即加入一定量的还原型靛蓝二磺酸钠溶液，采用此法时不需取样桶。
②水样中的铜能使测定结果偏高，但当水样中的铜含量小于10μg/L时，对测定结果影响不大。
③配制靛蓝二磺酸钠储备液时，不可直接加热，否则溶液颜色不稳定。储存时间不宜过长，如发现有沉淀则要重新配制。
④每次测定完毕后，应将锌还原滴定管内剩余的氨性靛蓝二磺酸钠溶液放至液面稍高于锌汞层，待下次试验时注入新配制的溶液。
⑤锌还原滴定管在使用过程中会放出氢气，应及时排除，以免影响还原效率。若发现锌汞齐表面颜色变暗，应重新处理后使用。
⑥氨性靛蓝二磺酸钠缓冲溶液放置时间不得超过8h，否则应重新配制。
⑦苦味酸是一种炸药，不能将固体苦味酸研磨、锤击或加热，以免引起爆炸。为安全起见，一般苦味酸中加有35%水分，使用时可以将湿苦味酸用滤纸吸去大部分水分，然后移入氯化钙干燥至恒重，并在干燥器内储放。
⑧取样与配标准色用的溶氧瓶规格必须一致，瓶塞要十分严密。取样瓶使用一段时间后瓶壁会发黄，影响测定结果，应定期用酸清洗干净。