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克死霉合成

非售品
CAS:6980-18-3
分子式:C14H25N3O9
分子量:379.38

我国春雷霉素是一种小金色放线菌(Actinomycetesmicroaurous)所产生的代谢物。

日本春日霉素是放线菌(Streptomyceskasugaensis)产生的代谢物。砂土管菌种的制备将预先处理好的砂和土以3:2或2:1均匀混合,分装于玻璃试管中,加棉塞,外用纱布包扎,高压蒸汽灭菌后,选择孢子生长丰满的斜面菌种加无菌水制成孢子悬液于砂土管中,经干燥并封口,置于2~5℃的水箱内保存。

斜面孢子制备斜面培养在试管或茄形瓶中进行,加棉塞,高压蒸汽灭菌后,在无菌室用接种环沾取少许砂土孢子涂于斜面上,于28℃培养11~12d至表面孢子丰满,呈粉灰色或粉红色。种瓶培养在无菌室用接种铲刮取少许斜面孢子接种于经灭菌而装有培养基的种子瓶中,于28℃恒温振荡培养30h左右,镜检菌丝量多,粗壮旺盛无杂菌,便可移种。

种子罐在300L种子罐中加入自来水150L,灭菌操作后于28℃接入菌种,保持罐温28℃和一定的通气量,连续搅拌20~24h,pH值上升至6.5。繁殖罐在1000L繁殖罐中加入培养基与水配料800L,调整pH值5.8~6.0,经灭菌操作后,冷至28℃移入菌种,接种量15%~20%,在罐温28℃及一定通气量下连续搅拌24h,镜检菌线量多,呈网状或短杆状。

发酵罐培养基经高温消毒灭菌后,经喷淋冷却,加入已清毒好的10000L发酵罐中,加水配料8000kg。于28℃移入菌种,接种量10%左右,维持罐温,空气搅拌发酵144~168h,菌丝大量繁殖,效价上升。

提炼春雷霉素的提炼可加入一定量草酸至pH值3~4,加热至65~70℃,板框压滤,除去滤渣,滤液经真空薄膜浓缩,测定效价至浓度20000~220000r/mL后,加入0.2%苯甲酸钠作防腐剂,即可包装,也可采用浓缩液经盐酸调节pH<3后,加入至7倍体积、40~45℃盐酸乙醇溶液中,出现白色絮状结晶,冷却滤出固体,红外干燥,为春雷霉素盐酸盐。