TLCS法测定熊胆中熊去氧胆酸及鹅去氧胆酸含量

(1)供试品：熊科动物棕熊UrsusarctosLinnaeus或黑熊SelenarctosthibetanusG.Cuvier的干燥胆。

(2)色谱条件：高效硅胶薄层板(烟台)；异辛烷-异丙醚-冰醋酸-正丁醇-水(6：3：3：1.8：0.6)为展开剂；饱和硫酸氢铵的5%硫酸乙醇溶液为显色剂，喷雾显色，于110℃加热10min，在自然光下和365nm紫外光灯下检视斑点的位置。

(3)对照品溶液的配制：精密称取熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、胆酸对照品，用甲醇溶解并制成每毫升各含1mg的溶液作为对照品溶液。

(4)样品溶液的制备：精密称取熊胆8mg，加30%氢氧化钠溶液1.5ml，于沸水浴中水解10h。用浓盐酸调pH1～2，乙酸乙酯提取(10ml×2次，5ml×2次)，合并提取液，浓缩，定容于2ml量瓶中，作为样品溶液。

(5)测定：吸取样品溶液1μl与对照品溶液1μl和2μl，分别交叉点于同一薄层板上，按上述薄层色谱条件，展开，取出，晾干，显色。照薄层扫描法进行反射锯齿法扫描；熊去氧胆酸的激发波长λex＝380nm，发射波长λem＝450nm；鹅去氧胆酸和胆酸的λem＝470nm，λex＝550nm。测量样品与对照品吸收度积分值，计算，即得。