阿魏酸的测定－高效液相色谱法

仪器设备：
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于8000。
1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件
2.1流动相：甲醇+0.1%磷酸溶液＝30+70
2.2检测波长：320nm
2.3柱温：室温

试样制备：
1. 称取供试品
取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约1g，精密称定，为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取阿魏酸对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160w，频率50khz）60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
 
应用范围
本方法采用高效液相色谱法测定妇科调经片中阿魏酸的含量。
本方法适用于中成药妇科调经片。
方法原理
本品加甲醇超声提取，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长320nm处检测阿魏酸的吸收值，计算出其含量。
 
试剂
1. 甲醇
2. 0.1%磷酸溶液
 
试样制备
1. 称取供试品
取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约1g，精密称定，为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取阿魏酸对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160w，频率50khz）60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
 
操作步骤
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ml，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长320nm处测定阿魏酸（c10h10o4）的峰面积，计算出其含量。